軸突起始段可塑性在MCD大鼠癲癇易感性中的作用研究.pdf

1、目的：建立卡莫斯汀(BCNU)誘導的皮質發(fā)育畸形(malformationof cortical development, MCD)大鼠模型，觀察MCD大鼠模型對氯化鋰-匹羅卡品(LiCl-PILO)致癇敏感性，研究致癇后皮質神經元軸突起始段(axon initial segment，AIS)的可塑性變化規(guī)律，探討AIS的可塑性變化在MCD大鼠癲癇易感性中的作用。
　　方法：
　　1.在孕鼠懷孕17天(E17d)時腹腔注射卡

2、莫斯汀(BCNU)，懷孕21天時生產仔鼠為MCD大鼠模型，Map1b免疫組化染色，驗證MCD造模是否成功，取6-8周齡MCD大鼠和正常發(fā)育大鼠，腹腔注射LiCl-PILO誘導癲癇持續(xù)狀態(tài)(status epileptics，SE)，建立MCD癲癇大鼠模型;
　　2.記錄和比較急性SE誘導成功率和死亡率，記錄MCD和普通正常發(fā)育大鼠癲癇模型急性期和慢性期腦電圖(EEG);
　　3.免疫熒光研究AIS區(qū)可塑性:a.分組:MCD+

3、SE組、MCD組、SE組和正常對照組;b.以SE后24小時、30天和60天為時間點取大鼠大腦組織制備冰凍切片，采用免疫熒光方法標記AIS區(qū)特異性蛋白ankyrinG，觀察并測量各四組大鼠皮質感覺運動區(qū)神經元AIS區(qū)長度變化。
　　結果：
　　1.Map1b免疫組化染色提示成功建立了MCD模型。
　　2.MCD大鼠致癇成功率和總死亡率與正常發(fā)育大鼠無明顯差異(P＞0.05)，但致癇成功大鼠死亡率較高(P＜0.05);

4、r>　　3.MCD大鼠和正常發(fā)育大鼠致癇急性期EEG形態(tài)相似，慢性期EEG可見自發(fā)放電，且自發(fā)放電幅度、持續(xù)時間、平均每小時自發(fā)放電次數(shù)均較正常發(fā)育大鼠增高(P＜0.001);
　　4.皮質感覺運動區(qū)神經元AIS區(qū)長度: a.SE后24小時，MCD+SE組較SE組、MCD組顯著縮短(P＜0.001)，SE組較正常對照組亦明顯縮短(P＜0.001)，而MCD組與正常對照組相比無顯著差異(P＞0.05); b.SE后30天和60天，M