肌肽對地塞米松誘導的離體大鼠白內障的保護作用.pdf

1、本文研究目的：觀察肌肽對離體大鼠晶狀體激素性白內障形成的抑制作用。 研究方法：Sprague-Dawley大鼠的220只透明晶狀體隨機分為五組：正常對照組(A：DMEM)，地塞米松組(B：DMEM+地塞米松10μM)，低濃度肌肽治療組(C：DMEM+地塞米松10μM+肌肽2mM)，高濃度肌肽治療組(D：DMEM+地塞米松10μM+肌肽5mM)，肌肽組(E：DMEM+肌肽5mM)。分別放入含培養(yǎng)基的無菌24孔板中，于37℃下，置5

2、0mL/LCO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，隔日換液。培養(yǎng)中每天用解剖顯微鏡觀察晶狀體，記錄晶狀體混濁程度。培養(yǎng)第1、3、5、7d分別從各組取10只晶狀體，測定晶狀體中的谷胱甘肽含量和過氧化氫酶、谷胱甘肽還原酶及Na+-K+ATP酶活性。7d從對照組、白內障組和肌肽治療組各取2只晶狀體制作HE染色切片，光鏡下觀察大鼠晶狀體組織學改變。 研究結果：培養(yǎng)7d，對照組和肌肽組僅產生晶狀體霧狀混濁，白內障組晶狀體出現(xiàn)重度核混濁，而肌肽治療組僅在晶

3、狀體核和皮質間出現(xiàn)可見的分界。 光鏡下可見對照組大鼠晶狀體纖維細胞為六邊形細胞，位于晶狀體淺層的細胞可見細胞核，但隨著向晶狀體內深入，細胞的細胞核及細胞器逐漸減少到消失。晶狀體纖維細胞之間排列非常緊密，細胞層次整齊。兩個肌肽治療組大鼠晶狀體形態(tài)與對照組類似，晶狀體纖維細胞之間排列非常緊密，細胞層次整齊。地塞米松組晶狀體纖維細胞出現(xiàn)水腫，深層纖維之間出現(xiàn)裂隙。淺層纖維細胞內出現(xiàn)大量的空泡樣結構，使纖維細胞的結構被破壞，纖維之間的緊

4、密排列變的紊亂，晶狀體細胞層次紊亂。晶狀體纖維失去正常結構，有的斷裂、崩解。細胞間隙加寬。 地塞米松組晶狀體谷胱甘肽含量和過氧化氫酶、谷胱甘肽還原酶及Na+-K+ATP酶活性呈時間依賴性下降。培養(yǎng)3d過氧化氫酶、谷胱甘肽還原酶和Na+-K+ATP酶活性與1d相比分別下降29.87％(P＜0.01)、22.71％(P＜0.05)、22.34％(P＜0.01)；培養(yǎng)5d，谷胱甘肽含量與1d相比下降30.62％(P＜0.05)；培養(yǎng)7

5、d，過氧化氫酶活性、谷胱甘肽含量、谷胱甘肽還原酶活性和Na+-K+ATP酶活性分別比1d下降約85.47％(P＜0.01)、53.63％(P＜0.01)、79.68％(P＜0.01)、75.37％(P＜0.01)。 在低濃度肌肽治療組，培養(yǎng)3d、5d、7dCAT活性較地塞米松組分別增加約24.10％(P＜0.01)、47.96％(P＜0.01)和79.93％(P＜0.01)，GR活性分別較地塞米松組增加約13.91％(P＜0.0

6、5)、45.77％(P＜0.01)和52.51％(P＜0.01)，Na+-K+ATP酶活性分別較地塞米松組增加約10.8％(P＜0.01)、44.6％(P＜0.01)和57.4％(P＜0.01)，培養(yǎng)5d和7d分別較地塞米松組增加約17.91％(P＜0.05)和34.69％(P＜0.01)。 在高濃度肌肽治療組，培養(yǎng)3d、5d、7dCAT活性較地塞米松組增加約24.92％(P＜0.01)、47.99％(P＜0.01)和80.23

7、％(P＜0.01)，GR活性分別較地塞米松組增加約14.52％(P＜0.05)、45.58％(P＜0.01)和56.28％(P＜0.01)，Na+-K+ATP酶活性分別較地塞米松組增加約11.3％(P＜0.01)、45.7％(P＜0.01)和57.6％(P＜0.01)；培養(yǎng)5d和7d分別較地塞米松組增加約20.35％(P＜0.05)和36.30％(P＜0.01)。 研究結論：肌肽通過保護抗氧化酶和Na+-K+ATP酶的功能抑制地