亞砷酸對人胰腺癌PANC-1細胞中RASSF1A的表達影響及其可能機制的探討.pdf

1、目的:
　　 本研究以人胰腺癌PANC-1細胞作為研究對象，采用不同濃度的亞砷酸處理人胰腺癌PANC-1細胞，觀察其對胰腺癌細胞增殖的影響；比較亞砷酸作用前后抑癌基因RASSF1A表達的變化，并探討亞砷酸引起該基因表達變化的可能機制，為胰腺癌新的治療方案提供理論依據。
　　 方法:
　　 MTT法檢測亞砷酸對人胰腺癌PANC-1細胞增殖的影響。處理組用濃度為4.8μmol/L、2.4μmol/L、1.2μmol/

2、L的亞砷酸加入人胰腺癌PANC-1細胞中，空白對照組不加藥物，作用48h后，采用反轉錄PCR(RT-PCR)檢測人胰腺癌PANC-1細胞中抑癌基因RASSF1A在亞砷酸處理前后mRNA水平的表達情況，采用甲基化特異性PCR(MSP)法檢測亞砷酸處理前后RASSF1A基因去甲基化的情況，用Quantity One軟件測量目的條帶灰度積值與內參條帶灰度積值的比，進行半定量分析。
　　 結果:
　　 (1)亞砷酸對胰腺癌細胞生

3、長增殖的影響亞砷酸濃度在1.2μmol/L-4.8μmol/L濃度時，隨著作用時間的延長，細胞抑制率逐漸增加(P<0.05)；在作用時間相同時，隨著藥物濃度從1.2μmol/L到4.8μmol/L增加，抑制率也逐漸增加(P<0.05)。亞砷酸在一定濃度范圍內對細胞增殖的抑制作用具有時間和劑量效應。
　　 (2)亞砷酸對胰腺癌細胞中RASSF1A mRNA表達的影響半定量RT-PCR分析人胰腺癌PANC-1中抑癌基因RASSF1A

4、 mRNA的表達，結果表明亞砷酸處理人胰腺癌PANC-1細胞48h后，隨著亞砷酸作用濃度的增加，抑癌基因RASSF1A mRNA表達逐漸增強?？瞻讓φ战M和處理組之間差異均有統計學意義(P<0.05)，不同處理組之間差異亦有統計學意義(P<0.05)。[3]亞砷酸處理前后RASSF1A的甲基化分析在細胞中，RASSF1A基因表現為高甲基化狀態(tài)，隨著亞砷酸作用濃度的增加，RASSF1A基因甲基化條帶的亮度逐漸減弱。但用亞砷酸作用48h后RA