宮頸鱗癌轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)乙酰肝素酶的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、背景與目的:
　　流行病學(xué)調(diào)查顯示，宮頸癌發(fā)病率有上升趨勢(shì)，嚴(yán)重威脅著女性的生命，位居女性惡性腫瘤死因之首。宮頸癌最主要的轉(zhuǎn)移途徑是淋巴轉(zhuǎn)移，而腫瘤的侵潤(rùn)與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤治療成功的主要障礙，淋巴轉(zhuǎn)移是目前明確的導(dǎo)致臨床治療失敗和死亡的重要原因。
　　腫瘤的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移能力由腫瘤細(xì)胞的多種生物學(xué)行為決定，其中腫瘤細(xì)胞對(duì)其周圍基質(zhì)蛋白的降解能力是一個(gè)重要方面，乙酰肝素酶(heparanase，HPA)是一種葡萄糖醛酸內(nèi)切酶，它能

2、在數(shù)個(gè)位點(diǎn)降解硫酸乙酰肝素，破壞細(xì)胞外基質(zhì)(extra cellular matrix，ECM)和基膜(basement membrane，BM)的完整性，促進(jìn)腫瘤的局部侵襲和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。我們的前期研究及一些國(guó)外的研究已證實(shí)HPA在宮頸癌原發(fā)灶中的表達(dá)顯著增高，是宮頸癌的重要生物標(biāo)志物。細(xì)胞角蛋白19(Cytokeratin19，CK19)為細(xì)胞角蛋白家族中分子量最小的成員，是構(gòu)成鱗狀上皮細(xì)胞骨架的重要蛋白質(zhì)之一，表達(dá)范圍嚴(yán)格，特異表達(dá)于

3、女性生殖道上皮，已成為上皮性腫瘤細(xì)胞較為敏感和特異的標(biāo)志。
　　國(guó)內(nèi)外都在尋找宮頸癌轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)特異性和敏感性的生物分子指標(biāo)，如能在術(shù)前準(zhǔn)確的預(yù)測(cè)淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移情況，即可準(zhǔn)確的了解腫瘤的范圍，選擇合適的治療方案，但目前對(duì)于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的診斷，尚缺乏有效的手段?；贖PA與宮頸癌以及與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系，本研究通過(guò)免疫組織化學(xué)法檢測(cè)宮頸鱗癌原發(fā)灶及轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中HPA的表達(dá)情況，首次分析了宮頸鱗癌淋巴結(jié)HPA的表達(dá)與臨床預(yù)后因素間的關(guān)系，以期

4、為宮頸鱗癌淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移診斷提供一新的分子指標(biāo)。
　　材料與方法:
　　收集鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院病理科2007年1月-2012年12月確診的、臨床資料完整的宮頸鱗癌石蠟標(biāo)本102例，其中術(shù)后常規(guī)病理診斷為淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者53例（A組）、淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移者49例（B組）。A組選取原發(fā)灶、轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)及未轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)3個(gè)部位，B組選取原發(fā)灶和淋巴結(jié)2個(gè)部位，用于免疫組織化學(xué)染色。
　　免疫組織化學(xué)S-P法分別檢測(cè)A、B兩組所選部位組織中

5、的HPA表達(dá)情況，同時(shí)行常規(guī)HE染色，HPA陽(yáng)性的淋巴結(jié)行CK19染色，以證實(shí)其為轉(zhuǎn)移的宮頸癌病灶。圖像分析技術(shù)記錄各組中HPA表達(dá)的平均灰度值，計(jì)算出陽(yáng)性單位。
　　采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，圖像分析數(shù)據(jù)采用(x)±s表示，各組間比較采用方差分析;HPA表達(dá)率采用卡方檢驗(yàn);生存曲線采用Kaplan-Meier方法;生存率比較采用Log-rank檢驗(yàn);多因素分析采用Cox回歸分析法。檢驗(yàn)水平α=0.05。
　　結(jié)

6、果:
　　1.術(shù)后常規(guī)病理診斷淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組（A組）中HPA的表達(dá)情況:A組原發(fā)灶和轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中HPA呈陽(yáng)性表達(dá)均為48例，陽(yáng)性率為90.6％，術(shù)后常規(guī)病理診斷未轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)HPA呈陽(yáng)性表達(dá)7例(13.2％);原發(fā)灶、轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)與未轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中HPA平均灰度值逐漸增高，而陽(yáng)性單位逐漸降低，組內(nèi)比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F灰度值=30.521，P灰度值=0.000;F陽(yáng)性單位=6.351，P陽(yáng)性單位=0.021);
　　2.術(shù)后常

7、規(guī)病理診斷無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組（B組）中HPA的表達(dá)情況:B組原發(fā)灶HPA呈陽(yáng)性表達(dá)40例(81.6％)，術(shù)后常規(guī)病理診斷未轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)HPA呈陽(yáng)性表達(dá)5例(10.2％);B組原發(fā)灶HPA平均灰度值明顯低于淋巴結(jié)(F=21.397，P=0.000)，原發(fā)灶HPA陽(yáng)性單位明顯高于淋巴結(jié)(F=4.827，P=0.037)。
　　3.宮頸鱗癌中HPA的表達(dá)與宮頸鱗癌臨床病理特征的關(guān)系:淋巴結(jié)HPA的表達(dá)率與宮頸鱗癌分期(P=0.013)、分化程

8、度(P=0.000)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P=0.000)均密切相關(guān)。
　　4.宮頸鱗癌中HPA的表達(dá)與生存時(shí)間的關(guān)系:Kaplan-Meier生存分析顯示，所有患者的中位生存時(shí)間(MOS，medianoverallsurvival)為(49.0±5.9)個(gè)月，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者M(jìn)OS為36.0個(gè)月，明顯低于淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移者的58.5個(gè)月(P=0.023);淋巴結(jié)HPA陽(yáng)性表達(dá)者M(jìn)OS為38.5個(gè)月，淋巴結(jié)HPA陰性MOS為57.0個(gè)月，二者比較

9、差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.040）。Cox模型多因素分析顯示淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、HPA表達(dá)是影響宮頸癌患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.HPA在宮頸鱗癌原發(fā)灶和轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中的表達(dá)均顯著增高，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是宮頸癌的獨(dú)立預(yù)后因素，可作為宮頸鱗癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的生物學(xué)檢測(cè)指標(biāo);
　　2.宮頸鱗癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者M(jìn)OS明顯低于淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移者，淋巴結(jié)HPA陽(yáng)性表達(dá)者M(jìn)OS明顯低于淋巴結(jié)HPA陰性表達(dá)者，提示淋巴結(jié)HPA