伽瑪?shù)墩丈浼凹讖婟堉委煂δz質細胞CX43及GFAP表達的影響.pdf

1、目的：γ刀放射外科已成為現(xiàn)代神經(jīng)外科的重要組成部分，在現(xiàn)行的影像和計劃系統(tǒng)條件下，有時很難做到靶區(qū)內能完全除外正常腦組織，病灶周圍的神經(jīng)組織仍會被放射外科治療影響，導致部分患者接受治療后正常神經(jīng)組織發(fā)生放射損傷，其確切機制尚不清楚。大量的放射外科試驗已證明膠質增生是放射損傷的主要形式，輻射損傷后膠質細胞數(shù)目增多，免疫組化染色膠質纖維酸蛋白（glial fibrillary acid protein，GFAP）表達增強，兩者的嚴重程度相關

2、。迄今為止γ刀治療后放射損傷的發(fā)生機理尚不明確，縫隙連接蛋白（Connexin，Cx）被認為是一個抑癌基因家族具有抑制細胞生長增殖的作用，其機制可能與Cx的非通訊作用有關，近來的研究已經(jīng)證明縫隙連接蛋白43（Cx43）的表達減少或缺失常導致細胞的異常生長甚至腫瘤的發(fā)生。糖皮質激素具有抗炎和減輕水腫的作用，臨床上已廣泛應用于中樞神經(jīng)放射性損傷的治療，是伽瑪?shù)缎g后放射性腦水腫的重要治療手段，糖皮質激素的藥理機制非常復雜，抑制細胞分裂和增生是

3、它的一種重要作用。此種作用可能與Cx表達的調控存在共同的信號轉導途徑。本實驗研究了伽瑪?shù)墩丈浜竽z質細胞Cx43和GFAP表達的變化以及放射性腦損傷中應用糖皮質激素對Cx表達的影響。初步探討了星形膠質細胞間縫隙連接在放射傷性腦損傷中的變化規(guī)律以及腦組織膠質增生及放射損傷發(fā)生的可能機制。為探索伽瑪?shù)缎g后放射損傷新的治療手段提供依據(jù)，為進一步臨床應用和研究提供參考。 方法：體外培養(yǎng)原代星形膠質細胞（astrocytes，Ast）分為正

4、常對照組和γ刀照射組，后者經(jīng)γ刀照射（邊緣劑量4、8、12、16、20、24、28、32、34、36Gy），培養(yǎng)72小時后檢測GFAP、Cx43。32Gy組經(jīng)γ刀照射后隨機分為1、5、10、20、30、40μg/ml組及實驗對照組，各組進一步隨機分為36、48、72、96、120h5個亞組。各組膠質細胞與相應劑量甲基強的松龍（methylpredrtisolone，MP）共培養(yǎng)，于36～120h各時間點檢測GFAP及Cx43。

5、結果：4～12Gy組與正常對照組無顯著差異，至16Gy組膠質細胞開始增生，GFAP表達陽性細胞數(shù)大于正常對照組且呈劑量依賴性增高，至32Gy組GFAP表達達最大值。Cx43表達在12Gy組即開始明顯下降且Cx43表達呈計量依賴性減低，在24至32Gy降低尤為顯著至32Gy組達最低值。添加MP后20～30μg/ml組Cx43呈時間依賴性上調，同時GFAP表達雖仍呈時間依賴性上升但GFAP峰值低于試驗對照組，峰值出現(xiàn)時間亦晚于試驗對照組。