金櫻子治療實(shí)驗(yàn)性IgA腎病大鼠的分子基礎(chǔ)研究.pdf

1、目的：探索傳統(tǒng)中藥金櫻子(Rosa Laeviga Michx,RLM)水醇提取液對實(shí)驗(yàn)性IgA腎病的治療作用，了解其作用機(jī)制。 方法：將36只大鼠隨機(jī)分成正常組、模型組和治療組，建立IgA腎病大鼠模型，經(jīng)過RLM水醇提取液治療數(shù)周后，檢查大鼠蛋白尿，血尿及其腎組織病理改變；采用放射性免疫方法測定腎組織勻漿中TXB<,2>和6K-PGF<,1α>的含量，以觀察腎臟組織血液的流動；提取腎組織蛋白，經(jīng)SDS電泳初步判斷，并采用表面增

2、強(qiáng)激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜技術(shù)(SELDI-FOF-MS)檢測腎臟組織蛋白質(zhì)組表達(dá)變化情況；RT-PCR方法檢測各組大鼠腎組織TGF-βmRNA和MCP-1mRNA基因表達(dá)，從基因水平和蛋白質(zhì)水平探討RLM治療IgA腎病的作用機(jī)制。 結(jié)果：造模完成時(shí)，正常組、模型組、治療組大鼠的尿蛋白分別為10.77±1.65，43.13±8.78和42.47±8.20，而經(jīng)過RLM水醇提取液治療5周后，這3組的尿蛋白則分別為8.29±1.31

3、，45.31±5.33，14.90±2.05，RLM治療組與模型組相比尿蛋白明顯下降(P<0.05)。經(jīng)過RLM水醇提取液治療后，治療組BUN、Cr、TC、TG均比模型組顯著性降低(P<0.05)。光鏡檢查大鼠腎組織，正常組腎小球系膜細(xì)胞無明顯增生，系膜區(qū)無增寬等；而模型組可見中重度的腎小球系膜細(xì)胞增生，系膜基質(zhì)增多，系膜區(qū)增寬，分葉不明顯等；RLM治療組則比模型組程度有所緩解。放免法檢測TXB<,2>和6K-PGF<,1α>,正常組、

4、模型組、治療組的TXB<,2>/6K-PGF<,1α>比值分別為0.82±0.07，1.44±0.11，0.71±0.05，治療組比模型組顯著性降低(P<0.05)。在蛋白質(zhì)水平上，3個(gè)實(shí)驗(yàn)組腎組織蛋白質(zhì)SDS電泳結(jié)果對比，存在2條明顯的小分子差異條帶，進(jìn)一步經(jīng)質(zhì)譜儀檢測，發(fā)現(xiàn)有1個(gè)差異顯著的蛋白峰，其相對分子質(zhì)量為12164Da，這個(gè)蛋白質(zhì)在正常組和治療組中高表達(dá)，而在模型組中低表達(dá)。在基因水平上，3個(gè)實(shí)驗(yàn)組TGF-βmRNA相對含量

5、分別為：0.5416±0.1847，1.5022±0.7343，0.6440±0.0518，而MCP-1mRNA相對含量分別為：0.3083±0.1594，0.8732±0.5017，0.4182±0.1933，治療組與模型組相比均有顯著性下降(P<0.05)。 結(jié)論：RLM水醇提取液可減輕尿蛋白的程度，降低因IgA腎炎而升高的大鼠血清尿素氮和肌酐水平，具有降脂作用。RLM水醇提取液能有效調(diào)節(jié)TXB<,2>/6K-PGF<,1α

6、>比值的平衡，改善腎血流；同時(shí)RLM水醇提取液還能下調(diào)TGF-βmRNA和MCP-1mRNA的表達(dá)水平，緩解腎組織炎癥；以及改變小分子蛋白的基因表達(dá)。 目的：通過測定金櫻子(Rosa Laeviga Michx，RLM)水溶液對大鼠肝組織脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA生成的影響，探討RLM體外抗氧化活性作用。 方法：丙二醛(malonyl dialdehydc,MDA)是氧自由基對不飽和脂肪酸引發(fā)的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的最終產(chǎn)物之一，

7、其含量可反映機(jī)體組織細(xì)胞脂質(zhì)過氧化作用的強(qiáng)度。MDA與硫代巴比妥酸(TBA)在酸性、高溫環(huán)境下反應(yīng)，縮合成紅色化合物，于532nm處有一吸收峰，可以以此檢測MDA的生成。以大鼠肝勻漿為體外實(shí)驗(yàn)體系，采用TBA比色法測定RLM水溶液對大鼠肝勻漿化學(xué)誘導(dǎo)脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA含量的影響。 結(jié)果：空白對照組大鼠肝臟組織MDA含量為39.04±0.33，產(chǎn)生量較高，說明其肝組織明顯產(chǎn)生脂質(zhì)過氧化反應(yīng)。而加入不同濃度(25、50、100、2