空氣顆粒性污染物對黑素細胞黑素合成的影響及其機制的初步研究.pdf

1、目的：
　　近年來，我國各大城市的空氣污染問題越來越受到人們的關注，關于空氣顆粒性污染與人體健康的研究逐年增多，但研究大多集中與對呼吸系統(tǒng)及心血管系統(tǒng)疾病的影響，對于皮膚疾病的影響研究較少。在皮膚領域有限的研究中，大部分研究關注于空氣顆粒性污染物對表皮角質形成細胞及真皮成纖維細胞的影響，而對黑素細胞影響的研究寥寥無幾?？諝忸w粒性污染物的組成復雜，其中有機化合物成分占顆粒物總質量的10％-30％，以多環(huán)芳烴類(PAHs)化合物為主[

2、1,2]，而臨床上亦有PAHs引起皮膚病理性色素沉著的報道[3]。本課題利用一種主要成分為多環(huán)有機化合物的空氣顆粒性污染物標準品SRM1649b的浸出液刺激正常人表皮黑素細胞(NHM)，旨在探究空氣顆粒性污染物是否會對正常人表皮黑素細胞黑素合成量及黑素合成相關基因的表達產生影響，從而引起皮膚顏色的改變。
　　方法：
　　從正常人皮膚組織分離純化表皮黑素細胞，制備空氣顆粒性污染物標準品SRM1649b浸出液，用不同濃度的SRM

3、1649b浸出液培養(yǎng)NHM，48小時后CCK-8法檢測不同濃度的SRM1649b浸出液對NHM生存率的影響并選擇適宜的實驗濃度。采用NaOH裂解法檢測各濃度實驗組黑素細胞內黑素相對含量;采用細胞免疫熒光法觀察SRM1649b浸出液刺激前后黑素細胞內芳香族化合物受體AHR的分布變化;用實時熒光定量PCR的方法檢測各濃度實驗組黑素細胞中芳香族化合物受體(AHR)及與黑素化過程相關轉錄因子小眼畸形相關轉錄因子(MITF)、黑素合成關鍵酶酪氨酸

4、酶(TYR) mRNA的表達情況。
　　結果：
　　正常人表皮黑素細胞表達AHR;在一定濃度范圍內，給予SRM1649b浸出液刺激正常人表皮黑素細胞可以引起細胞內AHR由細胞漿向細胞核內轉移;各濃度實驗組與對照組相比，AHR mRNA表達上調并與SRM1649b浸出液濃度呈正相關;與黑素合成相關的轉錄因子MITF及關鍵酶TYR mRNA表達以及細胞內黑素相對含量均有增加但與濃度無明顯相關性。
　　結論：
　　在一